平成25年度ＳＰＰ【講座Ａ】

１日目

　午前中に、ＤＮＡとはどんな物質かを復習し、実際にＤＮＡを抽出する体験を行った。 また、バクテリアについてその特徴と培養について知り、午後の実験の導入とする。 午後からは遺伝子組み換えについて学び、発光遺伝子を大腸菌に組み込む実験を行った。

　【写真】：マイクロピペットの操作練習をする参加者。チビタン（遠心分離器）を利用して スピンダウン→ボルテックス（攪拌）→スピンダウンの練習も行った。

　午前中に、ニワトリ、ブロッコリー、ヒトのＤＮＡの抽出実験を行った。 自分のＤＮＡを使用するため、実験を行うにあたって、本人だけでなく保護者からの承諾も得た。 午後からは大腸菌にＧＦＰ遺伝子を導入する実験を行った。培養結果は翌日観察した。

　【写真】：抽出されたブロッコリーのＤＮＡ（白くもやっとしたもの）

２日目

　午前中に昨日の培養結果を観察した。遺伝子組み換えをしなかったＤＮＡを対照区として、 ＧＦＰ遺伝子およびβ-ラクタマコーゼ（抗生物質に対して耐性を示す）遺伝子を組み換えた 大腸菌との比較をした。培地にはアラビノース（糖）を加え、アラビノースが存在するときのみ ＧＦＰ遺伝子が発現することを確認。オペロン説を実際に体験することができた。

　【写真】：ＧＦＰ遺伝子がはたらいて、青く光るコロニーの様子

　２日目の午後には「ＤＮＡ分析」の実験を行った。あらかじめ用意された試料を使い、 ＤＮＡがどのように犯罪捜査等に利用されているかを体験した。

　【写真】：電気泳動後、エチジウムブロマイドで染色された結果。 左端はマーカー、左から２つ目が目的とする資料、右から３つ目と同じであることが判定できた。

　ＰＣＲ法を利用して、自分のＤＮＡを増幅させ、第１６染色体にあるＡＬＵ配列の有無を判定させた。 自分のＤＮＡを使うため、本人だけでなく、保護者からの承諾を得た。

　【写真】：抽出した自分のＤＮＡをサーマルサイクラーにセットし、ＰＣＲ法を開始する様子

　【写真】：増幅したＤＮＡをアガロースゲルにアプライ（試料をセット）する様子。 この後３０分程度電気泳動を行った後、エチジウムブロマイドで染色し、結果を観察した。